Uitgebreide strategie voor hoogwaardige vloeistofchromatografie: van principes tot operationele voorzorgsmaatregelen

Hoge prestatie vloeistofchromatografie

Hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC) is een analytische techniek waarbij vloeistof als mobiele fase wordt gebruikt. Het pompt een enkel oplosmiddel of gemengd oplosmiddel, buffer en andere mobiele fasen door een hogedrukinfusiesysteem in een chromatografische kolom, die een stationaire fase bevat. Binnen de chromatografische kolom worden componenten in het monster effectief gescheiden als gevolg van verschillende interactiekrachten met de stationaire fase en de mobiele fase. Vervolgens komen deze gescheiden componenten de detector binnen voor gedetailleerde analyse, waardoor een uitgebreide analyse van het monster wordt bereikt.

Het principe is gebaseerd op het verschil in de verdelingsverhouding van het mengsel tussen vloeistof-vaste stof of twee niet-mengbare vloeistoffen. Deze methode is bijzonder geschikt voor de analyse van stoffen met hoge kookpunten, moeilijk te verdampen, thermisch instabiel en biologisch actief. Tegelijkertijd is hogedrukvloeistofchromatografie ook op grote schaal toegepast in chirale analyse, wat belangrijke technische ondersteuning biedt voor onderzoek op het gebied van chemie, biologie en geneeskunde.

Bedieningsstappen van hoogwaardige vloeistofchromatografie

Starten van de apparatuur: Schakel eerst de aan/uit-schakelaars van de computer en de chromatograaf beurtelings in om het instrument te starten.

Inloggen op het werkstation: Log in op het vloeistofchromatografiewerkstation om u voor te bereiden op volgende handelingen.

Configuratie en parameterinstelling: Nadat u de instrumentconfiguratie hebt geselecteerd, voert u de nodige parameterinstellingen uit, zoals mobiele faseverhouding, detectorgevoeligheid, enz.

Zelftest van het instrument en vaststelling van de methode: Start de zelftest van het instrument om er zeker van te zijn dat het instrument in goede staat verkeert. Nadat u de zelftest hebt doorstaan, stelt u overeenkomstige methoden vast op basis van experimentele vereisten.

Systeembalans: Voordat u met het verzamelen van gegevens begint, moet u ervoor zorgen dat het systeem gedurende een bepaalde periode onder vaste omstandigheden draait om een ​​evenwichtige toestand te bereiken.

Gegevensverzameling: Voer handmatige injectie uit wanneer de basislijn stabiel is. Klik op het Start-pictogram in de gegevensverzamelingsinterface om te beginnen met het verzamelen van gegevens. Bewaar het chromatografiebestand na verzameling.

Gegevensanalyse en rapportuitvoer: Selecteer de gegevensanalysefunctie in de hoofdinterface en open het chromatografiebestand voor verwerking en analyse. Nadat de analyse is voltooid, wordt het rapport uitgevoerd en wordt de test beëindigd.

Uitzetten en reinigen: Voordat u de machine uitschakelt, moet u de machine voldoende tijd laten draaien en de kolom volledig wassen met de mobiele fase om er zeker van te zijn dat er geen residu achterblijft voordat u de machine uitschakelt.

Voorzorgsmaatregelen bij het gebruik van vloeistofchromatografie

Veilig gebruik: Vermijd altijd direct contact met uw handen met de naald en gebieden die in contact kunnen komen met het monster om de persoonlijke veiligheid en de reinheid van het instrument te garanderen.

Naaldwasoperatie: Voordat een monster wordt opgezogen, moet de naald zorgvuldig worden gewassen met ethanol of methanol om mogelijke onzuiverheden of resten te verwijderen.

Elimineer luchtbellen: Zorg ervoor dat er tijdens het bemonsteringsproces met de spuit geen luchtbellen worden gemengd. Luchtbellen kunnen worden geëlimineerd door de naald naar boven te richten en tegen de naaldbuis te bewegen, terwijl de juiste zuigsnelheid behouden blijft.

Inbrengsnelheid en -diepte: Het inbrengen moet snel en stabiel zijn om ervoor te zorgen dat de snelheid en diepte van elke monsterinjectie consistent blijven, wat de sleutel is om de nauwkeurigheid van de analyseresultaten te garanderen.

Monsterinjectie: Wanneer de naaldpunt in het midden van de verdampingskamer wordt gestoken, moet de monsterinjectie worden gestart om ervoor te zorgen dat het monster volledig kan worden verdampt en effectief kan worden geanalyseerd.

Controleer op luchtlekkage: Als blijkt dat de druk in de vergassingskamer daalt, de piekvorm lager wordt of de breedte groter wordt, kan dit worden veroorzaakt door luchtlekkage. Op dit moment moet de afdichtring op tijd worden vervangen om de normale werking van het instrument te herstellen.

Classificatie van injectienaalden: De injectienaalden van gas- en vloeistofchromatografen kunnen niet worden gemengd. Gaschromatografen gebruiken puntige naalden, terwijl vloeistofchromatografen platte naalden gebruiken. Mengen kan schade aan het instrument of onnauwkeurige analyseresultaten veroorzaken.

Parameterstabiliteit: Tijdens het testproces moet de stabiliteit van de instrumentparameters worden gehandhaafd en moeten parameters naar believen worden vermeden om de nauwkeurigheid van de analyseresultaten te garanderen.

Gegevensbeveiliging: Gebruik niet uw eigen USB-flashdrive om gegevens te kopiëren om de gegevensbeveiliging en -integriteit te garanderen.